Schneider, Daniela:

Charakterisierung der Strahlensensitität von Neuoblatomzellen in Abhängikeit vom TrkA/TrkB Status : Idenifizierung von Zielgenen durch Erstellung von Expressionsprofilen

Duisburg, Essen (2010), 89 Bl.
Dissertation / Fach: Medizin
Medizinische Fakultät » Universitätsklinikum Essen » Zentrum für Kinder- und Jugendmedizin » Klinik für Kinderheilkunde III
Eggert, Angelika (Doktorvater, Betreuerin)
Jendrossek, Verena (GutachterIn)
Dissertation
Abstract:
In dieser Arbeit sollten mRNA Microarrayprofile an einem Neuroblstomzellkulturmodell erstellt und analysiert werden, um erste Anhaltspunkte für die molekularen Mechanismen der Tropomyosin-related Kinase (Trk) - Rezeptor vermittelten Strahlenresistenz von Neuroblastomzellen zu erhalten. Besonderes Augenmerk wurde auf die Unterschiede und Gemeinsamkeiten regulierter Gene als Antwort auf Bestrahlung in den Zelllinien SY5Y-TrkA und SY5Y-TrkB gelegt. Identifizierte Expressionsunterschiede wurden bezogen auf den Trk-Status der entsprechenden Zelllinien (SY5Y-Vec, SY5Y-TrkB und SY5Y-TrkA) mit und ohne Stimulation durch deren jeweilige Liganden, Nerve Growth Factor (NGF) für SY5Y-TrkA, bzw. Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) für SY5Y-TrkB mittels Analysis of Variance (ANOVA) Test statistisch analysiert. Diese Genmuster wurden miteinander verglichen. Die entsprechenden Zelllinien waren zunächst in unbestrahltem Zustand. Anschließend wurden Genexpressionsveränderungen im Zeitverlauf nach Bestrahlung abhängig vom Trk-Status der Zelllinien und in An- und Abwesenheit der Liganden untersucht. So sollten erste Hinweise für Mechanismen der unterschiedlichen Strahlenresistenz der untersuchten Zelllinien gefunden werden. Dabei wurde besonderes Augenmerk auf DNA-Reparaturgene gelegt. Die wesentlichen Ergebnisse der Arbeit lassen sich folgendermaßen zusammenfassen:

1. Der basale Trk-Rezeptor Expressionsstatus von SY5Y-Neuroblastomzellen führt zu größeren Expressionsunterschieden in Form von Geninduktion oder Genregulation als die zusätzliche exogene Aktivierung der Rezeptoren durch ihre spezifischen Liganden BDNF für SY5Y-TrkB bzw. NGF für SY5Y-TrkA, die lediglich eine geringe Änderung im Expressionsmuster bewirkt.

2. Die stabile Expression des TrkA-Rezeptors vermittelt auch in Abwesenheit des spezifischen Liganden NGF eine gewisse Resistenz gegenüber Bestrahlung. Ursache hierfür könnte die Herauf-Regulation bestimmter DNA-Reparaturgene sein, vor allem des Gens X-ray repair cross complementing 4 (XRCC4), das an der chromosomalen Stabilität TrkA-tragender Neuroblastomzellen beteiligt sein könnte.

3. Da in SY5Y-TrkA Zellen auch das klassische DNA-Reparaturgen p21 stark induziert wird, vermutete ich eine erhöhte DNA-Reparaturkapazität dieser Zellen, die in nachfolgenden Studien mittlerweile auch nachgewiesen werden konnte.

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